在生物制品的制备中，不可忽视DNA残留的去除，细胞裂解释放目标产物的同时，也会产生一些杂物。随着越来越多的生物制品（重组蛋白、Vero细胞疫苗、细胞治疗药物等）进入治疗领域，核酸残留是各类质控标准的重中之重。

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WHO和各国药物监管机构一般控制100pg/每剂量的残留DNA，仅限特殊情况下允许10ng/剂量。我国药典中明确规定酵母、大肠杆菌表达的生物制品中DNA残留量不超过10ng/剂量。

生产工艺中有多种方式去除残留DNA，但是如果需要在更前端、更有效地去除核酸，同时减小纯化压力，目前倾向于选择使用高效的核酸酶解——广谱核酸酶。

Part.01 广谱核酸酶

广谱核酸酶，又称为全能核酸酶，一种来源于粘质沙氏菌（Serratia marcescens，又称灵杆菌）的非特异性核酸内切酶。它不含有原核生物表达的细菌内毒素。

在功能上，它能够剪切各种形式DNA和RNA，无论是单链、双链、线状、环状或超螺旋形式的DNA和RNA，切断磷酸二酯键从而产生5’-磷酸核苷酸或5’-磷酸寡核苷酸。广谱核酸酶对核酸碱基序列无特异性要求，可在链内任意核苷酸间进行切割，可用于除去生物制品中的核酸。

Part.02 新葡的京集团3512vip|产品优势

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·  高度稳定性

·  比活性大于1000KU/mg蛋白

·  无动物源性成分

·  避免原核细胞的内毒素污染

·  不含蛋白酶残留

·  供应稳定，到货快

Part.03 应用领域

1.去除宿主核酸残留

广泛用于疫苗工业、蛋白和多糖类制药工业中，可使疫苗和蛋白类产品核酸污染达到皮克(pg)级别。

2.促进细胞培养来源颗粒纯化

在病毒、AAV载体及包涵体等细胞来源颗粒的纯化过程中，提高得率并有效提高终产物纯度。

3.降低细胞裂解液黏度

缩短处理时间，改善分离效果，提高病毒/蛋白产量，利于下游层析纯化操作。

4.促进生物分析样品纯化

可用于ELISA样品制备，色谱层析、双相电泳及印迹分析等过程中来提高分辨率和样品回收率。

—  Vero细胞培养制备的应用  —

哺乳动物细胞特别是连续细胞系被用于生产疫苗和治疗性生物制品，Vero细胞系是哺乳动物细胞中使用较为广泛的载体，用于增加生物制品的产量。2005年，WHO推荐Vero细胞用于生产狂犬病疫苗，然而，包括Vero细胞系在内的许多连续细胞系在用于制造人用疫苗时具有致瘤性。使用广谱核酸酶可以去除Vero细胞中残留的DNA，使宿主残留DNA低于100pg/ml^[2]。

Part.04 产品性能

文献参考：

[1] Rai T S ,  Adams P D . ChIP-sequencing to map the epigenome of senescent cells using benzonase endonuclease[J]. Methods in Enzymology, 2016, 574:355-364.

[2] B, Si Ming Li A , et al. “Removing residual DNA from Vero-cell culture-derived human rabies vaccine by using nuclease.” Biologicals 42. 5(2014):271-276.